Criblage des conditions de cristallisation des protéines - étude de cas
Le criblage des conditions de cristallisation des protéines est un procédé important dans la détermination des structures des protéines. Les protéines sont cristallisées dans le but de déterminer leur structure moléculaire par cristallographie aux rayons X des protéines. Cependant, le processus le plus long pour déterminer la structure moléculaire est la cristallisation d'un monocristal des protéines. Cela implique de réaliser des criblages sur un grand nombre de « tampons » jusqu'à ce que la solution soit idéale pour favoriser la cristallisation des protéines.
D'une façon générale:
Une faible polydispersité est bonne, et un indice de polydispersité supérieur à 20 est mauvais pour la croissance d'un cristal de qualité.
On a constaté que les résultats des instruments de diffusion de lumière peuvent être utilisés pour simplifier le procédé de cristallisation des protéines. La diffusion de la lumière peut être utilisée pour examiner des échantillons de protéine rapidement et avec des volumes d'échantillon réduit.
Présentations:
Présentation à télécharger sur le criblage des conditions de cristallisation des protéines.Dans la détermination de la structure d'une protéine, la cristallographie par rayons X des protéines est toujours à l'heure actuelle le meilleur outil disponible. Le point crucial reste l'étape pratique de cristallisation de la protéine ou plus précisément, la recherche des conditions optimales de cristallisation des protéines. L'effet tampon des buffers est souvent appliqué pour trouver une réponse pertinente ou pour limiter le domaine de recherche. Une approche différente implique la mesure des interactions entre le solvant et la protéine par le biais du second coefficient de viriel. Si ce paramètre tombe dans une « fenêtre de cristallisation» étroite, les conditions sont idéales. Néanmoins cette méthode prend du temps. Une image plus rapide de la protéine en solution peut être obtenue par diffusion dynamique de lumière. La largeur de la distribution de taille (polydispersité) est liée à la chance d'atteindre de bonnes conditions de cristallisation. La diffusion dynamique est une technique rapide et très sensible pour évaluer la possibilité de cristallisation des protéines en solution.
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