결합 상수

결합 상수는 둘 이상의 분자 간 상호 작용 및 결합 이벤트를 측정할 때 사용되는 운동 매개 변수입니다. 결합 속도 상수(ka, kon 또는 on-rate)는 한 분자가 두 번째 분자에 결합하여 복합체를 형성하는 속도입니다. 이 수치는 초당 몰(분자 수의 표준 단위) M-1s-1로 기록됩니다.

결합 상수는 어떻게 측정합니까?

Creoptix 기술인 WAVEsystem과 같은 일부 바이오센서를 사용하여 결합 동역학을 분석할 때, 한 분자가 바이오센서 표면(칩)에 고정되고 이를 '리간드'라고 불립니다. 두 번째 분자는 미세유체 흐름을 통해 흐르며 '분석물'이라고 합니다. 

이미지 오른쪽: 결합 상호 작용 측정에서 생성된 곡선(센서그램)

먼저, 완충액이 리간드가 고정된 센서를 지나 흐르게 하여 기준선을 설정합니다. 그 후, 샘플(분석물)을 흘려보냅니다. 분석물은 결합 단계에서 리간드와 결합합니다. 이때부터 분석물이 리간드에 결합하여 농도 표준에서 복합체를 형성하는 비율로 결합 상수를 계산할 수 있습니다. 따라서 초당 몰을 사용하여 표현합니다.  

결합 속도와 해리율(kd)은 친화도(평형 해리 상수, KD)를 정의하고 결합 동역학(두 분자 간의 동적 상호 작용)을 결정합니다. KD는 kd/ka로 계산되며 평형 상태의 분석물이 리간드의 절반을 점유하는 분석물의 농도를 결정합니다.

WAVEsystem으로 결합 상수를 측정하는 방법

WAVEsystem

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산학 연구를 위한 신약 개발 및 생명과학용 차세대 생체분석 기기

분자 간 상호작용과 결합 이벤트의 정확하고 효율적인 측정은 다양한 분야의 기본 연구에서 필수이며 신약 개발 프로그램에 없어서는 안 되는 요소입니다. 

WAVEsystem은 결합 동역학을 측정하면서 결합 상수를 측정할 수 있는 광학 바이오센서입니다.

사양 WAVE WAVEdelta
결합 상수 범위

ka = 103 – 5x107 M-1 s–1(소분자)
ka = 103 – 3x109 M-1 s–1(대분자)

ka = 103 – 5x107 M-1 s–1(소분자)
ka = 103 – 3x109 M-1 s–1(대분자)

결합 상수를 측정하는 데 사용할 수 있는 다른 방법은 무엇입니까?

도파관 간섭법(GCI)을 사용하는 WAVEsystem 외 결합 상수를 측정하는 일반적인 방법으로는 생물층 간섭법(BLI) 또는 표면 플라스몬 공명(SPR)이 있습니다. 

기술 비교 페이지에서 BLI, SPR 및 GCI의 기능에 대해 자세히 알아볼 수 있습니다.

WAVEsystem

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