Guía de cinética | Cinética de unión con el sistema WAVE. Download now

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WAVEchip

Chip de sensor microfluídico sin obstrucciones para cada necesidad

El innovador diseño de nuestro cartucho microfluídico patentado admite muestras crudas, muestras patógenas, solventes abrasivos y partículas grandes de hasta 1000 nm que normalmente solo se consiguen con ensayos basados en placas. Los WAVEchips están diseñados exclusivamente para el WAVEsystem.

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Información general

Mida las muestras más difíciles

El innovador diseño fluídico integra todos los microfluídicos en el cartucho desechable (no dentro del núcleo del dispositivo) y coloca válvulas estándar de gran diámetro en los procesos posteriores del instrumento en lugar de tener microválvulas cerca del chip. 

Mediante la combinación de los microfluídicos y el biosensor óptico en un único cartucho desechable, el sistema WAVEsystem ofrece una consistencia de las muestras crudas que normalmente solo se consigue con ensayos basados en placas. Los tipos de muestra compatibles incluyen suero o plasma al 100 %, lisatos celulares, preparaciones de membranas crudas, objetivos de fármacos grandes, partículas similares a virus (VLP, del inglés virus-like particles), liposomas y agregados (fibrillas) sin riesgo de obstrucción.

El cartucho que admite productos químicos también permite que sea posible trabajar con altas concentraciones de DMSO, acetonitrilo y otros disolventes orgánicos típicos de las bibliotecas de fragmentos, y detergentes viscosos que permiten explorar las condiciones de solubilización y purificación de proteínas de membrana. Además, como los cartuchos son independientes y desechables, eliminan la contaminación cruzada, lo que protege las muestras y garantiza datos más confiables.

Sin microválvulas para transiciones rápidas

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El diseño del cartucho permite tiempos de transición ultrarrápidos de 150 ms para una determinación confiable de constantes de disociación de 10 s–1 (semivida de 69 ms), lo que permite el estudio cinético de fragmentos de unión débil.

Sin obstrucciones para muestras crudas

Los microfluídicos sin obstrucciones se adaptan a una amplia gama de tipos de muestras para conservar la actividad y el contexto biológico, lo que ahorra tiempo en pasos de purificación perjudiciales y obstrucciones que hacen que otros sistemas queden fuera de línea.

Mediante la combinación de la tecnología patentada de interferometría acoplada a rejilla (GCI, del inglés Grating-Coupled Interferometry) con microfluídicos sin obstrucciones, el Creoptix® WAVEsystem proporciona datos de alta calidad incluso de los tipos de muestra más exigentes y logra una resolución superior en términos de señal y tiempo en comparación con otras formas de cuantificación sin marcadores. La inmovilización del ligando sin marcadores se logra típicamente mediante el acople covalente del ligando al biosensor a través de grupos de amina (-NH2), tiol (-SH2) o aldehído (-COOH) que se producen de forma natural, o a través de la unión del ligando a un anticuerpo que se ha unido de manera covalente a la superficie del biosensor. El mantenimiento de las muestras en condiciones fisiológicas y de configuración nativa reduce el riesgo de inactivación o desnaturalización de proteínas, lo que garantiza que los datos sin procesar generados sean una representación fiel de la actividad cinética. 

Compatibilidad con WAVEchip

 
WAVEchip sensor Sensor surface matrix Immobilization modality Suggested applications
PCP Quasi-planar PC hydrogel Amine coupling Large ligands and/or analytes such as proteo-/liposomes, viruses, VLPs
PCP-STA Pre-immobilized streptavidin
Quasi-planar PC hydrogel
Biotin Large biotinylated ligands, analytes such as liposomes, viruses, VLPs
PCP-RST Regenerable streptavidin surface
Quasi-planar PC hydrogel
Biotin Large biotinylated ligands, ligand screening
PCP-PAG Pre-immobilized fusion protein A/G
Quasi-planar PC hydrogel
IgG For capturing the broadest range of IgG and FC-tagged proteins
PCP-NTA Pre-immobilized NTA
Quasi-planar PC hydrogel
His-Tag Large His-tagged ligands, analytes such as liposomes, viruses, VLPs
PCP-LIP Pre-immobilized lipophilic groups
Quasi-planar PC hydrogel
Lipid Hydrophobic (large) ligands such as liposomes, membrane vesicles
PCZ Functionalized with a zwitterionic polymer bearing carboxylic acids and tertiary amines in similar densities, quasi-planar PC hydrogel Amine coupling Low fouling, ideal for coupling proteins with low isoelectric points or polyanionic ligands
PCL Low capacity, thick PC hydrogel with a lower amount of negative charges (approx. 25%) Amine coupling Complex matrices such as serum, culture supernatant. Requires sulfo-NHS for activation
PCH Thick PC hydrogel Amine coupling Large ligand-to-analyte molecular weight ratio, general purpose
PCH-NTA Pre-immobilized NTA
Thick PC hydrogel
His-Tag His-tagged ligands, general purpose
PCH-STA Pre-immobilized streptavidin
Thick hydrogel
Biotin Biotinylated ligands, general purpose
PCH-RST Regenerable streptavidin surface
Thick hydrogel
Biotin Biotinylated ligands, ligand screening
DXP Quasi-planar DX hydrogel Amine coupling Large ligands and/or analytes such as proteo-/liposomes, viruses, VLPs
DXH-STA Pre-immobilized streptavidin
Thick DX hydrogel
Biotin Biotinylated ligands, general purpose
DXH Thick DX hydrogel Amine coupling Large ligand-to-analyte molecular weight ratio, general purpose
PC- = polycarboxylate, DX- = Carboxymethyldextran.
DX coated sensors available upon request

Preguntas frecuentes

¿Con qué son compatibles los WAVEchips®?
  • Suero y plasma al 100 %, y precipitado celular
  • Solventes no tradicionales, incluidos altos porcentajes de acetonitrilo y DMSO
  • Detergentes viscosos y aditivos para solubilizar proteínas de membrana
  • Preparaciones de membrana celular, parcialmente solubilizado, material no purificado
  • Partículas similares a virus (VLP), liposomas o nanodizcos utilizados como estructuras de solubilización
  • Moléculas de enlace grandes: preparaciones de nanopartículas y membrana cruda
¿Con qué frecuencia puedo utilizar los WAVEchips?
Esto depende del tipo de WAVEchip®, del método de inmovilización utilizado y del comportamiento del ligando inmovilizado. Por ejemplo, las proteínas del ligando marcadas con histidina capturadas en una superficie de Ni-NTA pueden ser regeneradas por EDTA y el ligando se puede recapturar varias veces. Esto significa que se puede utilizar un chip de este tipo en general repetidamente, siempre que permanezca insertado en el Creoptix® WAVEsystem. Son posibles las regeneraciones con chips de Ni-NTA y proteína A/G, lo que permite múltiples usos; sin embargo, esto no se logra fácilmente con estreptavidina u otros chips.
¿Cuánto ligando se puede inmovilizar en los chips?
La capacidad de inmovilización depende del tipo de chip y del método de inmovilización. El chip de mayor capacidad de la cartera de productos de Creoptix® WAVEsystem, el 4PCH WAVEchip, puede inmovilizar hasta 35 000 pg/mm2 de BSA, pero la capacidad experimental depende del ligando exacto utilizado. El software WAVEcontrol tiene incorporado un simulador que ayuda a determinar la densidad del ligando necesaria para una respuesta teórica aceptable.